HPLC法内定秘方益母内服液中水苏碱的含量
【撮要】 手段 构建高效液相色谱法内定秘方益母内服液中水苏碱的含量。办法 以Kromasil C18 (5 μm，250 mm×4.6 mm)为色谱柱，乙腈0.05 mol·L-1盐酸二氢钾滤液（容积比18∶82，pH值5.5）为活动相，光速1.0 mL·min-1，柱温35 ℃，检测跨度215 nm，以外标法停止检测。后果 水苏碱进样量正在1.00～25. 00 μg范畴外存正在优良的线性联系，r=0.999 7，样品均匀加样回收率为98.1% (n=9)，RSD为1. 17%。论断 本办法烦琐，后果精确牢靠，反复性好，可作为掌握该药剂品质的办法。 中国佳诚论文网www.thesislib.com编者。
【要害词】 水苏碱 秘方益母内服液 高效液相色谱法
益母草是一种保守的妇科名药，性味辛、苦，微寒，存正在活血化淤、调经利水之效用，罕用于妇女体液没有调、痛经、早产，以及跌打损害、水肿和疮疡肿毒等症。 古代 药理钻研发觉，益母草中益母草碱、水苏碱等多种活性苛性碱也存正在好转括约肌缺血、增多冠状动脉血流、进步心性能，抑止血小板汇集、抗凝、抗血栓构成等多种作用，且作用速决［1］。
秘方益母内服液是由益母丸（ 中国 药典1977年版）改剂型而成，内中的次要无效因素水苏碱是益母草中苛性碱类含量内定的目标性因素， 教案 简报多采纳紫外分光光度法、薄层扫描法和高效毛细血管电泳法停止内定，没有只操作进程烦琐、所需工夫长，并且水苏碱正在湿度大时的稳固性没有现实［2-5］。白文使用高效液相色谱法内定秘方益母内服液中次要无效因素水苏碱的含量，办法烦琐，后果精确牢靠，再现性好，可作为掌握该药剂品质的办法。
1 仪表与试剂
1.1 仪表
Agilengt 1200 系列高效液相色谱零碎（Agilent Co. Ltd.，USA）：G1376A高效液相泵，G1367B主动进样器，G1316A柱温箱，G1365B多跨度UV检测器，Hystar色谱任务站。
1.2 试剂
水苏碱比照品（中国食品生物制品检定所，批号：110712200508）；秘方益母内服液（山东省临沂银雀山制药厂，10 mL·支-1，批号：2008211、2008423、2008512）；乙腈（色谱纯，江苏汉邦高科技无限公司），水为二次重蒸水，其余试药均为综合纯（山东禹王化学试药无限公司）。
2 办法与后果
2.1 色谱环境
色谱柱:Kromasil C18 (5 μm，250 mm×4.6 mm，天津琛航高科技仪表无限公司需要)；活动相:乙腈0. 05 mol·L-1盐酸二氢钾滤液（容积比18∶82，pH值5.5），光速:1.0 mL·min-1，检测跨度:215 nm，柱温:35 ℃，进样量:10 μL。
2.2 比照品滤液的制备
精细称取105 ℃枯燥至恒重的水苏碱过量，置5 mL定量瓶中，加丙醇溶化并浓缩至刻度，得0.5 mg·mL-1的比照品滤液［6］，摇匀，备用。
2.3 最大吸引跨度的取舍
采纳岛津UV160紫外分光光度计，对于丙醇配制的0.5 mL·min-1的比照品滤液正在200～400 nm跨度范畴内停止扫描，于215 nm处有一度最大吸引特色峰，故取舍为检测跨度。
2.4 阳性比照滤液的制备
取没有含益母草的阳性比照品，按消费厂家需要的消费工艺以及供试品滤液配制办法制备。
2.5 供试品滤液的制备与内定办法
各批号秘方益母内服液以0.45 μm微孔滤膜过滤，弃去初溶液，辨别精细量取续溶液2.0 mL，置10 mL定量瓶中，退出丙醇酿成供试品滤液，进样10 μL。同声取比照品滤液10 μL进样，辨别内定峰面积，按外标法 打算 样品的含量。
2.6 零碎实用性实验
取比照品滤液、供试品滤液、阳性比照液，辨别进样，后果水苏碱的保存工夫为6.075 min，实践塔板数为6 800，与相邻峰的结合度大于1.5，相符中中药典的规则。阳性比照图谱正在水苏碱色谱峰的保存工夫处无显然吸引峰，标明便条中其余因素对于水苏碱的内定无搅扰，见图1。
A.比照品滤液;B.阳性比照滤液;C.供试品滤液
图1 HPLC色谱图（略）
Figure 1 HPLC chromatograms
2.7 规范直线与线性范畴
取比照品滤液，辨别进样2.0、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0 μL，记载其色谱峰的峰面积。以峰面积对于进样量作图，制图规范直线，后果水苏碱归队方程：Y=978.2 X+21.4，r=0.9997，线性范畴：1.00～25.00 μg。
2.8 稳固性实验
取同一批供试品滤液（批号2008423），辨别于0、2、4、8、12、24 h内定水苏碱含量，后果其RSD值为0. 23%，注明供试品滤液正在本试验环境下24 h内稳固。
2.9 精细度实验中国佳诚论文网www.thesislib.com编者。
取1份比照品滤液，反复进样5次，内定峰面积,后果其RSD值为1.23%，标明试验精细度优良。
2.10 反复性实验
取同一批供试品滤液（批号2008423）5份，辨别进样内定水苏碱峰含量，后果其RSD值为1. 72%，标明反复性优良。
2.11 回收率实验
精细量取已知含量的秘方益母草内服液（批号2008423）过量，按80%、100%和120%的对比，精细退出水苏碱比照品滤液过量，摇匀，进样内定， 打算 得均匀回收率为98.1%，RSD=1.17%，见表1。
表1 水苏碱加样回收率实验后果（略）
Table 1 Recovery experiments
2.12 样品内定 辨别精细量取比照品滤液和供试品滤液进样内定，按外标法以峰面积辨别打算得3批内服液样品中水苏碱的含量辨别为0.69、0.71、0. 72 g·mL-1。
3 议论
3.1 秘方益母内服液中含水苏碱、益母草碱、益母草啶和益母草宁等多种苛性碱，内中水苏碱为次要的活性因素，存正在扩张外周血脉、增多血流量、抗血小板凝集等作用，取舍内定药剂中的水苏碱存正在专人性。
3.2 苛性碱类因素运用C18反相柱停止综合时，因为反相柱的封尾没有彻底，残余的微碱性硅醇基团会与苛性碱类成散发理化学吸附而招致拖尾景象，而活动相中微量的酸能使苛性碱类因素事后到达“酸饱合”的成效，缩小了苛性碱类因素与反相柱硅醇基的吸附，好转拖尾。通过比拟发觉，白文所采纳的乙腈0.05 mol·L-1盐酸二氢钾滤液（容积比18∶83，pH 5.5），结合成效好，保存工夫恰当。
3.3 采纳高效液相色谱法对于秘方益母内服液中的次要因素水苏碱停止含量内定，回收率高，操作容易，稳固性和再现性好，能够作为该药剂品质掌握的办法。
【 参考 教案 】
［1］ 刘新华，辛宏，朱依谆.没有只是“益母”草：益母草的中枢掩护作用［J］.生 道学 报，2007，59(5): 578-584.
［2］ 国度药典委员会.中华群众集权中药典2005年版：一部［S］.北京：化学 轻工业 塔斯社，2005：576.
［3］ 唐盈，王晓强.四种含益母草中成药中水苏碱的含量内定［J］.药品综合刊物，1989，9(1): 22-24.
［4］ 张玲，时延增，于宗渊,等.双跨度薄层扫描法内定益母内服液中水苏碱的含量［J］. 中国 药科大学学报，1996，27(1): 16-18.
［5］ 姜舜尧，黄晓强，陆蕴如.多少种国药苛性碱的毛细血管区带电泳综合［C］.香港:社会医药塔斯社，1999:28.
［6］ 戚建中.产复康颗粒中水苏碱的HPLC综合［J］.中成药，2001，23(1): 16-18.
